超碰一区二区三区,一级特黄大欧美久久久,美女视频一区免费观看,香蕉久久免费电影

客戶咨詢熱線:
15021010459
首頁 > 技術文章 > 細胞凍存液的作用和注意事項

細胞凍存液的作用和注意事項

更新時間:2021-12-23

閱讀:4856

   細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。
  細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中,及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中,雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是不可少的實驗操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候,細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等等導致實驗失敗,如果沒有原始細胞的凍存,則因為上述的意外而前功盡棄。
  細胞凍存常用凍存液的成分如下:
  20%血清(FBS)、10%DMSO、70%1640培養(yǎng)液;或90%血清(FBS)、10%DMSO,更可防止細胞內冰晶形成。將DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占總體積的10%,然后濾膜過濾后分裝保存?zhèn)溆谩?/div>
  細胞凍存液中的作用: DMSO在4℃時對細胞無明顯毒性,分子量小、溶解度大、易透過細胞膜,降低細胞外未結冰溶液中溶質濃度,使細胞免受高濃度溶質的損傷,細胞內水分也不會過分外滲,避免了細胞過分脫水皺縮;DMSO與水分子結合,可使冰點下降,減少細胞內冰晶的形成,從而減少冰晶損傷。
  注意事項:
  1.DMSO 不用高壓滅菌;DMEM不能高溫高壓滅菌,可以過濾除菌。
  2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存。
  3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(體積比)。
主站蜘蛛池模板: 三原县| 尼木县| 冷水江市| 渑池县| 阜宁县| 大英县| 甘谷县| 绵阳市| 平顶山市| 敖汉旗| 平顶山市| 柳江县| 买车| 仪征市| 越西县| 射阳县| 天全县| 宜兰县| 凯里市| 沙雅县| 宁晋县| 依兰县| 平邑县| 花垣县| 玉山县| 宜丰县| 五河县| 天镇县| 加查县| 荆州市| 星座| 星子县| 大同县| 泾阳县| 巴彦淖尔市| 株洲县| 阿克苏市| 广东省| 高唐县| 定西市| 柳林县|